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附红细胞体病(Eperythozoonsis)是一种人畜共患有传染性疾病,其病原体是附红细胞体。该病早在本世纪20年代就被人们发现,只是近几年来才引起畜牧兽医工作者和医学工作者的关注。1996年10月至1997年6月,我们对甘肃省兰州市的部分军犬、 警犬及家犬进行了抽样调查,现将结果报告如下。
一、材料和方法
1、 犬静脉血液
采自驻甘肃省兰州市部队、武警、公安及市民家中饲养的狼种犬、狮子犬前肢静脉血39份,加抗凝剂,4℃冰箱保存备用。
2、检查方法
(1)压滴镜检
取静脉血一滴于载玻片上,加等量生理盐水稀释,轻盖盖玻片,用显微镜在高倍镜和油镜下观察。
(2)姬姆萨染色镜检
取静脉血涂片,常规固定,姬姆萨染色法染色,油镜下观察。
3、判定标准
阳性:高倍镜下观察20个视野无附红体这判为阴性。
4、犬附红体低温保存试验
将犬阳性抗凝血11份保存于4℃冰箱中,每隔7天镜检一次,观察红细胞的感染率和附红体的活动状况。
5、犬附红体人工感染率雏鸡性血试验
实验组:取犬附红体检测结果为的抗凝血25μl,加入1ml雏鸡性抗凝血中混匀,放入4℃冰箱保存10份,37℃培养箱保存10份,接种后立即进行镜检,结果犬红细胞的感染率为,而雏鸡红细胞表面干干净净,无附红体感染。而后每隔2天检一次。
对照组:设雏鸡阴性血4℃、37各5份,犬阳性血4℃、37℃各5份。
二、结果
1、犬附红体的形态
显微镜高倍观察,犬附红体形态多为环形、圆形、卵圆形、顿点形、杆状和巴蹄状等多种形态,大多数聚集在红细胞表面,少则3~5个,多则达20~30个,红细胞失去球形形态,边缘不整,有的呈齿轮状、星芒状,有的呈不规则多边形等多种扁平样形状。附红体活动灵活自如,伸展、旋转、前后、左右、上下均可活动。
姬姆萨染色油镜下观察,附红体被感染成淡紫色,外周有一白环,当调动微动螺旋时,折光性较强,附红体中央发亮,形似空泡,其它观察的形状同上。
2、犬附红体感染率
共抽查抗凝血32份进行镜检,结果见下表(略)
3、犬积压液红细胞感染程度
在34份阳性血液中,+者占0.00%(0/34),艹者占14.71%( 5/34),者占11.76%(4/34),者占73.53%(25/34)。表明很多红细胞的数量也不等,少则3~5个,多则达20~30个,镜下观察红细胞失去球形立体形态,边缘不整而呈齿轮状、量芒状、不规则多边形等多种扁平样形状。
4、犬附红体体4℃冰箱保存试验
共观察11份阳性血液,7天后发现样品原为+或艹者全部变为Ⅲ或Ⅳ,21天时附红体仍存活,且运动性较强,28天时观察同21天结果相似,但运动性减弱,33天观察时附红体数量有所减少,运动性减弱。
5、犬附红体人工感染雏鸡阴性血试验
实验组:接种后2、4天检测,无论是4℃冰箱保存的还是37℃培养箱保存的,犬红细胞感染率仍为Ⅳ,雏鸡红细胞未受感染,第5天37℃培养箱保存的10份血样全部发生凝固而无法检测,第6、8、10天检测4℃冰箱保存的10份,结果有1份雏鸡抗凝血个别细胞胞表面有1-2个犬附红体,红细胞感染率为+;第15天观察,10份雏鸡阴性抗凝血中有9份受到犬附红体不同程度的感染,鸡红细胞犬附红体不同程度有感染,鸡戏细胞有犬附红体的感染率为+者5份,艹者1份,Ⅲ者1份,Ⅳ者2 份;鸡红细胞表面少则有1-2个犬附红体,血浆中也有大量附红体,且运动性很强,第20天观察,1份阳性血仍为阴性,9份阳性血检测结果为,犬附红体减少,个别犬红细胞表面携带有附红体,有80%左右的犬红细胞无附红体,鸡附红体有感染率全部为+,血浆中有附红体,但运动性减弱。
对照组:犬阳性血一直保持阳性,雏鸡阴性血一直保持阴性。
三、小结与讨论
1、本次共抽查了甘肃省兰州市39条犬的静脉血,结果发现犬附红体的感染率很高,特别是狼种犬,感染率高达96%,平均感染率87.16%。在调查中未发现有症状的犬,但如此高的感染率而不发病,说是犬附红体有毒力较弱。随着附红体在血液中数量有增加,必然会影响、干扰甚至破坏红细胞及血液中其它成分有功能,在抵抗力下降或有应激因素(运输、疲劳、饥饿、风雨侵袭等)的刺激时,可能会出现一系列有临床症状。
2、据资料报道,犬附红体病的症状主要表现为精神不振,四肢乏力,结膜苍白或黄染,卧地嗜眠,体温升高至40℃左右,心跳130-180次/分钟,呼吸30-60次/分钟,食欲减少,有呕吐现象,粪便少且时干时稀,尿黄。3-5天后少数严重患犬由于虚脱、休克及残废转归外,多数可耐过急性经过而转入慢性经过,临床上仍表现为不同程度的贫血、消瘦、黄胆、低烧(体温39℃左右)等为主要症状,病程可拖至一个月或更长一些时间。但有相当一部分患犬因继发肠道细菌性感染,出现腹泻或下简,患犬仍主消瘦、食欲废绝等症状。有的患犬则转入隐性经过,成为“长期带虫”者。病理剖检,主要变化为血液稀薄不易凝固,全身粘膜不同程度的黄染,淋巴结肿胀,肺脏水肿,心包积液,心冠脂肪黄染,心肌松驰,腹腔积液,肝肿黄染,胆囊充盈,胆汁浓稠,脾脏肿大,质地松软等。除继发感染病变外,其他组织器官均无明显眼观病变。
3、附红体病的治疗较为容易,国内外报道较多的是用新胂凡纳明、四环素、黄色素、血虫净等进行治疗,治愈率可达95%以上,磺胺类药物、青霉素、链霉素等对本病很难奏效。
4、该病的传播途径,已知的是吸血昆虫和扁虱、刺蝇、蚊、蜱等及小型啮齿动物是该病的传播媒介,其它途径目前并不十分清楚。我们曾对人和奶牛都存在垂直传播的现象,至于犬是否存在这种现象,有待进一步进行探讨,其它途径目前并不十分清楚。
5、附红体的分类,按其所存在的部位,亦应属血液病,但根据目前国际上普遍采用的《伯杰细菌鉴定手册》,附红体应属立克次氏体目无浆体科附红细胞体属,其病原体是附红体。
6、本试验表明,附红体在4℃环境中,至少可存活33天,说明其对低温抵抗力比较强。而犬附红体在感染雏鸡感染力不强,但也存在交叉感染的现象,这为进一步系统研究附红体打下了一定基础。