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雌龟与雄龟在外形上有较为明显的区别:雄龟个体较小，龟壳黑色，躯干部长而薄，尾长柄细，具有特殊臭味;雌龟个体较大，龟壳棕黄色，纵棱显著，躯干部短而厚，尾短柄粗，没有特殊臭味。

更为可靠和准确的鉴别方法是:在乌龟的繁殖季节，抓住成龟，当它的四肢和头尾皆欲缩人壳内时，用手指使劲住它的头及四肢，不让它有时间呼吸，此时乌龟泄殖孔内即排出副膀胱水，然后生殖器慢慢地外突，若只向外突出纵列的皱纹内壁者为雌龟;如有一充血膨大呈褐紫色的交接器外突者则为雄龟，如果在交配季节，雄龟还会有乳白色的精液排出。